鱼精蛋白价格 鱼蛋白和海藻精哪种好

制备脂质体为什么要用pbs不直接用去离子水

()百包封率测定

、脂质体离

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适化结构亲脂性物镶嵌双层膜内包裹脂质体其包封率取决于所用脂质浓度种情况包封率达90％定要除未包裹物水溶性物言包裹物仅总量部必须脂质体悬液除未包裹物由于脂质体比包裹物要利用同离除未包裹物些凝胶滤柱层析渗析等；若包裹物质蛋白质或DNA或者未包裹物能形较聚结物则利用与脂质体浮力、密度同采用诸离等进行离

()柱层析

凝胶渗透层析技术广泛用于脂质体悬液离除未包裹物用于悬液脂质体组技术实验室效且快速规模产虽用凝胶滤纯化技术较困难且价格昂贵另外脂质体洗脱介质稀释能需要增加浓缩步骤

柱层析填料用葡聚糖Sephadex G-50其步骤与规致必须指：①葡聚糖表面存着能与脂质体膜结合并相互作用微部位虽种作用并影响脂质体凝胶柱流特征仍导致少量脂质损失使膜稳定性增加导致膜渗透性改变及包裹物质渗漏种现象脂质浓度较低情况特别应予注意般通加脂质体品柱量或用空脂质体预先柱饱解决通使用20mg脂质制单层脂质体饱10g凝胶；②若凝胶颗粒太细较脂质体能滞留凝胶柱层脂质体宜选用粗级凝胶(粒径50～150μm)单层脂质体则用任何级别凝胶

(二)渗析

简单用除未包裹物(化合物除外)需要复杂技术须昂贵仪器且能够扩产通断改换渗析介质除所游离物费般室温条件要除95％游离物至少需要更换三渗析介质间10～24h外渗析介质渗透强度应与脂质体悬液致否则渗析改变脂质体悬液体积且能引起包裹物质渗漏

(三)离

同离力离离除同种类脂质体游离物效完全除游离物需重复悬浮离使脂质体沉所需离力取决于脂质体某种程度取决于混悬液絮凝状态脂质体且布窄需要高速离及冰冻条件低速(2000～4000r／min)离能使脂质体沉降

显于量脂质体利用高速冰冻离极其耗能昂贵适于离脂质体于比较脂质体低速离缩短作间并且同较稀脂质体悬液浓缩所需浓度避免脂质体遭破坏必须注意保证重复混悬介质渗透压与脂质体悬液渗透压相致

二、脂质体包封率测定

EN％=(1Cf／Ct)×100％

式Cf游离物量；Ct脂质体悬液物总量

再介绍两种快速、用量少且适应性广离游离物质并测定EN％

1．柱离(minicolumn centrifugation mod)

取塑料注射针筒填滤膜作衬片装入用理盐水溶胀Sephadex G-50再针筒置离管低速离(2000r／min3min)除余理盐水凝胶柱变干并能与针筒内壁离定量加入脂质体品注意勿滴入柱床边缘离(2000r／min3min)使脂质体进入离管待测再凝胶柱加入少量理盐水依离离液能再脂质体或仍含少量主要取决于脂质体及组游离物程葡聚糖吸附离凝胶柱再加理盐水离使柱干游离物洗脱进入离液反复几直至全部游离物均柱离洗脱别测定包封物及游离物浓度计算EN％(图20—10)

柱离优点脂质体悬液几乎没稀释于实验室规模试验较用离除未包裹物快速测定包封率

2．鱼精蛋白凝聚(protamine aggregation)

用于任何组脂质体性或带负电荷脂质体(图20－11)：

取0.1ml脂质体悬液于10ml锥形离管加入0.1ml鱼精蛋白溶液(10mg／ml)搅匀静置3min再加3ml理盐水室温条件离吸取2ml清液测定游离物浓度剩余清液弃沉淀物0.6ml 10％ Triton X-100重新混悬使脂质体膜材溶解再补充理盐水至总体积3.2ml测定包封物浓度便算EN％

(二)包裹容积测定

包裹容积(entrapped volume)指制脂质体相于每毫克磷脂所占内水相体积般微升(μl)表示包裹容积计算通测定包裹脂质体内物总量推测设脂质体内水性介质物浓度与始制备所用物浓度经离除未包裹物没物质脂质体渗漏则容易计算许情况设往往能立例用二乳化制备脂质体干燥除机溶剂内水相能失；另外由于内外渗透压异水进入或逸脂质体测定内部容积办直接测定水量例利用具光谱性液体代替内相介质利用核磁共振(NMR)测定测水量脂质体高速离(200000g6h)沉降紧密沉淀除尽清液沉淀物D20(deuterium oxide)重新混悬由于膜于水渗透性使整体系H20D20快达平衡取少量用于磷脂量测定剩余部作水NMR扫描峰高与D20含水浓度比与标准溶液照即求水量计算脂质体包裹容积

三、脂质体稳定性

脂质体放置程能发种同变化磷脂质氧化水解短链磷脂并膜形具溶解性衍物；另外脂质体发凝聚、融合等物理变化导致包裹物质渗漏脂质体制剂若要发展产品应市必须贮藏期间具良稳定性；体内达靶组织前或发挥其缓释作用前亦须保持定及完整性已证明脂质体血液比较稳定随磷脂化性质、胆固醇比例脂质体、双层数目等同脂质体体内稳定性所同若贮存程物脂质体迅速渗漏则必限制脂质体应用价值

()化稳定性

脂质体组磷脂氧化降解应制备即加防止采用些措施尽能降低氧化程度例使用新鲜提纯磷脂新鲜蒸馏溶剂尽量避免高温并充氮氧条件完制备程脂质体贮存于惰性环境等

膜材组加入抗氧剂种效目前用抗氧剂α-育酚种毒食用脂质据认蛋卵磷脂氧化解α-育酚加入减缓另选择降低氧化程度使用饱磷脂代替饱磷脂源磷脂其饱度随植物、蛋黄、哺乳物依增加于蛋黄磷脂饱度取决于物饲料及所用提纯

(二)物理稳定性

脂质体包裹物渗漏凝聚、融合团块等物理稳定性问题脂质体研究工作难题些研究表明单层脂质体贮存体积增物渗漏与脂质及包裹物性质关由性磷脂制备脂质体凝聚主要由于范德华力相互作用所致膜材加入少量负电荷磷脂(10％PA或PG)克服膜材加入微量1,3-二乙酰-2-磷脂酰胆碱阻止较脂质体融合

较脂质体制备适条件般发融合于40nm单层脂质体由于膜曲率易于发融合特别相变温度更易发

采用前体脂质体等重建脂质体较避免脂质体贮存发化物理变化重建脂质体三种类型：含或含干脂质膜；含或含冻干脂质混合物：含冻干脂质体于干脂质膜或冻干脂质混合物重建所获物包封率限特别亲水性物包封率高悬液含较游离物实际应价值于具适结构亲脂性物重建产品达较满意包封率重建程所需条件例搅拌程度要求高温超声处理等实际应用甚便

于亲水性物选择含冻干脂质体重建形式冰冻程若加入亲水性聚合物葡聚糖能产自由流能利于冻干脂质体水性介质重建例含胰岛素冻干脂质体用种处理其重建包封率达原70％即冰冻重建程胰岛素渗漏率约30％包裹低量物渗漏率能更高些种技术保证脂质体制剂贮存稳定性提供效

四、脂质体测定

脂质体影响脂质体体内处置脂质体重要质量指标测定脂质体激光扫描电显微镜或库尔特粒度析疑电镜测定准确直接观察每脂质体并获各范围内脂质体外形信息要观察量脂质体本非费相反．激光扫描非简单且作快速仅能测脂质体平均性质与类似采用库尔显考查包裹物质物体内行前必须测定该物质脂质体量采用述离除未包入脂质体游离物质利用式计算百包封率(Encapsulation percentageEN％)特粒度析仪测脂质体布二种均难描述更精细结构关于粒度测定细节参见本书第十二章

五、脂质体析

()磷脂质析

1．含量测定

直接测定磷脂质浓度比较困难干燥磷脂总含定量残留溶剂或其杂质磷脂广泛使用测定磷脂非直接例含磷量测定于制备脂质体数磷脂言每摩尔磷脂均含1mol磷仅别例外每摩尔磷脂含2mol磷品磷脂浓度通测定磷含量计算介绍二种磷测定

(1)Bartlett

磷脂机磷酸解机磷加入钼酸铵使转化磷钼酸磷钼酸用萘磺酸铵定量原蓝色蓝色强度由光光度测定与标准品(磷酸二氢钾)照即计算含磷量该灵敏度较高且重现性若品含少量机磷则干扰测定

脂质体混悬于缓冲液宜采用Stewart该利用磷脂机溶剂与亚铁硫氰酸铵形色复合物受机磷存影响进行测定计算使用与磷脂结构关转换吸收值换算磷脂毫克数该随磷脂基同异利用磷脂标准液绘制标准曲线计算该适于测定含未知磷脂混合物特别须指该能用于甘油磷脂测定若脂质体含卵磷脂甘油磷脂则用该前者定量再通Bartlett测定总磷脂计算甘油磷脂量

2．磷脂质薄层层析

薄层层析检查磷脂质纯度主要手段与所层析磷脂质薄层层析利用磷脂液态机相亲水性固定相同亲性液相固定相展同磷脂具同保留间根据亲水性强弱改变展剂组改变磷脂两相配系数用固定相硅胶展剂则用①：甲醇：水：(65：25：4 V／V)；②：甲醇：水：氨水(65：35：2.5：2.5 V／V)；③：丙酮：甲醇：醋酸：水(6：8：2：2：1 V／V)；④：环烷(1：1 V／V)等用显色剂碘用50％硫酸 - 甲醇液或液显色

(三)磷脂氧化程度

1．磷脂氧化

磷脂脂肪酸氧化主要由于游离基作用电磁波辐射或者微量游离金属离催化脂肪酸碳链首先脱氢原形游离基进与空气氧发连锁反应含双键碳链更易受影响聚合饱磷脂特别容易氧化降解含单或饱脂肪酸脂质混合物磷脂氧化三阶段进行：①单双键偶合；②氧化物形；③形乙醛及链断裂

2．氧化指数测定

氧化指数用检测游离基偶合指标氧化偶合磷脂230nm左右具紫外吸收峰别于未脂典型紫外吸收图谱图20－12

内提作制备脂质体膜材卵磷脂其氧化指数应控制0.2测定磷脂溶于水乙醇配定浓度澄明溶液别测定波233nm及215nm吸收值按式计算：

氧化指数 = A233nm／A215nm

3．氧化物测定

卵磷脂氧化产丙二醛及溶血磷脂等丙二醛(MDA)酸性条件与硫酸(TBA)反应种红色染料(TBA-Pigment)

该化合物波535nm处特异吸收吸收值即反映磷脂氧化程度丙二醛量与溶血间关系进行研究实验证明每毫升含卵磷脂理盐水丙二醛含量超2.3μg37℃放置1～2h即产溶血

除述估计磷脂氧化程度外根据聚合饱脂肪酸链氧化阶段发断裂或缩短用气 - 液色谱解些酰基链变化

(四)胆固醇析

与磷脂质类似胆固醇纯度及其氧化产物用气 - 液色谱进行检测另外由于胆固醇论游离型酯化型都能与含铁硫酸试剂反应铁复合物波610nm处紫外吸收采用标准胆固醇溶液照计算胆固醇量

六、脂质体灭菌

许研究论值注意氧情况仍发游离基反应导致双重或三重偶合形产氧化物另外降解步程要消耗偶合双键终降解产物增加同笫步降解产物减少故难用种试验评估磷脂氧化程度甚至即使应用几同试验仍仅能致估计氧化程相速率文都认脂质体宜用加热灭菌办且各类辐射及各种化灭菌剂敏所能使用滤灭菌或采用菌作进行制备影响脂质体广泛应用于临床重要原

近内采用100℃ 30min湿热灭菌获功灭菌前脂质体形态及均明显变化渗漏率约5％另采用辐射灭菌即用60钴发γ射线三磷酸腺苷脂质体甲氨蝶呤脂质体作辐射灭菌照射剂量15～20kGy菌试验结均由试验前阳性转阴性脂质体粒径灭菌前显著变化灭菌所致渗漏率较

灭菌实用性能与混悬介质种类、磷脂组及纯度等关采用121℃加热20min灭菌处理几种脂质体发现理盐水脂质体发凝聚等渗糖溶液羟基化合物溶液发凝聚加热灭菌具较高氧化物值含蛋卵磷脂散液稍变黄改用具低氧化物值蛋卵磷脂、氢化蛋卵磷脂或DPPC则变化性pH充入氮气阻止颜色变化加入α-育酚效经0.4μm膜滤由蛋卵磷脂组脂质体变变化介质类型明显影响加热灭菌期间包裹羧基荧光素阴离负电荷脂质体(PC／chol／PG)发渗漏使用电荷脂质体(PC／chol／十八胺)仅加热灭菌期间发渗漏且贮存间渗漏

感觉这样的提问是没有意义的

还是自己找下资料吧

制备脂质体为什么要用pbs不直接用去离子水

值注意氧情况仍发游离基反应导致双重或三重偶合形产氧化物另外降解步程要消耗偶合双键终降解产物增加同笫步降解产物减少故难用种试验评估磷脂氧化程度甚至即使应用几同试验仍仅能致估计氧化程相速率

、脂质体离

适化结构亲脂性物镶嵌双层膜内包裹脂质体其包封率取决于所用脂质浓度种情况包封率达90％定要除未包裹物水溶性物言包裹物仅总量部必须脂质体悬液除未包裹物由于脂质体比包裹物要利用同离除未包裹物些凝胶滤柱层析渗析等；若包裹物质蛋白质或DNA或者未包裹物能形较聚结物则利用与脂质体浮力、密度同采用诸离等进行离

()柱层析

凝胶渗透层析技术广泛用于脂质体悬液离除未包裹物用于悬液脂质体组技术实验室效且快速规模产虽用凝胶滤纯化技术较困难且价格昂贵另外脂质体洗脱介质稀释能需要增加浓缩步骤

柱层析填料用葡聚糖Sephadex G-50其步骤与规致必须指：①葡聚糖表面存着能与脂质体膜结合并相互作用微部位虽种作用并影响脂质体凝胶柱流特征仍导致少量脂质损失使膜稳定性增加导致膜渗透性改变及包裹物质渗漏种现象脂质浓度较低情况特别应予注意般通加脂质体品柱量或用空脂质体预先柱饱解决通使用20mg脂质制单层脂质体饱10g凝胶；②若凝胶颗粒太细较脂质体能滞留凝胶柱层脂质体宜选用粗级凝胶(粒径50～150μm)单层脂质体则用任何级别凝胶

(二)渗析

简单用除未包裹物(化合物除外)需要复杂技术须昂贵仪器且能够扩产通断改换渗析介质除所游离物费般室温条件要除95％游离物至少需要更换三渗析介质间10～24h外渗析介质渗透强度应与脂质体悬液致否则渗析改变脂质体悬液体积且能引起包裹物质渗漏

(三)离

同离力离离除同种类脂质体游离物效完全除游离物需重复悬浮离使脂质体沉所需离力取决于脂质体某种程度取决于混悬液絮凝状态脂质体且布窄需要高速离及冰冻条件低速(2000～4000r／min)离能使脂质体沉降

显于量脂质体利用高速冰冻离极其耗能昂贵适于离脂质体于比较脂质体低速离缩短作间并且同较稀脂质体悬液浓缩所需浓度避免脂质体遭破坏必须注意保证重复混悬介质渗透压与脂质体悬液渗透压相致

二、脂质体包封率测定

EN％=(1Cf／Ct)×100％

式Cf游离物量；Ct脂质体悬液物总量

再介绍两种快速、用量少且适应性广离游离物质并测定EN％

1．柱离(minicolumn centrifugation mod)

取塑料注射针筒填滤膜作衬片装入用理盐水溶胀Sephadex G-50再针筒置离管低速离(2000r／min3min)除余理盐水凝胶柱变干并能与针筒内壁离定量加入脂质体品注意勿滴入柱床边缘离(2000r／min3min)使脂质体进入离管待测再凝胶柱加入少量理盐水依离离液能再脂质体或仍含少量主要取决于脂质体及组游离物程葡聚糖吸附离凝胶柱再加理盐水离使柱干游离物洗脱进入离液反复几直至全部游离物均柱离洗脱别测定包封物及游离物浓度计算EN％(图20—10)

柱离优点脂质体悬液几乎没稀释于实验室规模试验较用离除未包裹物快速测定包封率

2．鱼精蛋白凝聚(protamine aggregation)

用于任何组脂质体性或带负电荷脂质体(图20－11)：

取0.1ml脂质体悬液于10ml锥形离管加入0.1ml鱼精蛋白溶液(10mg／ml)搅匀静置3min再加3ml理盐水室温条件离吸取2ml清液测定游离物浓度剩余清液弃沉淀物0.6ml 10％ Triton X-100重新混悬使脂质体膜材溶解再补充理盐水至总体积3.2ml测定包封物浓度便算EN％

(二)包裹容积测定

包裹容积(entrapped volume)指制脂质体相于每毫克磷脂所占内水相体积般微升(μl)表示包裹容积计算通测定包裹脂质体内物总量推测设脂质体内水性介质物浓度与始制备所用物浓度经离除未包裹物没物质脂质体渗漏则容易计算许情况设往往能立例用二乳化制备脂质体干燥除机溶剂内水相能失；另外由于内外渗透压异水进入或逸脂质体测定内部容积办直接测定水量例利用具光谱性液体代替内相介质利用核磁共振(NMR)测定测水量脂质体高速离(200000g6h)沉降紧密沉淀除尽清液沉淀物D20(deuterium oxide)重新混悬由于膜于水渗透性使整体系H20D20快达平衡取少量用于磷脂量测定剩余部作水NMR扫描峰高与D20含水浓度比与标准溶液照即求水量计算脂质体包裹容积

三、脂质体稳定性

脂质体放置程能发种同变化磷脂质氧化水解短链磷脂并膜形具溶解性衍物；另外脂质体发凝聚、融合等物理变化导致包裹物质渗漏脂质体制剂若要发展产品应市必须贮藏期间具良稳定性；体内达靶组织前或发挥其缓释作用前亦须保持定及完整性已证明脂质体血液比较稳定随磷脂化性质、胆固醇比例脂质体、双层数目等同脂质体体内稳定性所同若贮存程物脂质体迅速渗漏则必限制脂质体应用价值

()化稳定性

脂质体组磷脂氧化降解应制备即加防止采用些措施尽能降低氧化程度例使用新鲜提纯磷脂新鲜蒸馏溶剂尽量避免高温并充氮氧条件完制备程脂质体贮存于惰性环境等

膜材组加入抗氧剂种效目前用抗氧(2)Stewart剂α-育酚种毒食用脂质据认蛋卵磷脂氧化解α-育酚加入减缓另选择降低氧化程度使用饱磷脂代替饱磷脂源磷脂其饱度随植物、蛋黄、哺乳物依增加于蛋黄磷脂饱度取决于物饲料及所用提纯

(二)物理稳定性

脂质体包裹物渗漏凝聚、融合团块等物理稳定性问题脂质体研究工作难题些研究表明单层脂质体贮存体积增物渗漏与脂质及包裹物性质关由性磷脂制备脂质体凝聚主要由于范德华力相互作用所致膜材加入少量负电荷磷脂(10％PA或PG)克服膜材加入微量1,3-二乙酰-2-磷脂酰胆碱阻止较脂质体融合

较脂质体制备适条件般发融合于40nm单层脂质体由于膜曲率易于发融合特别相变温度更易发

采用前体脂质体等重建脂质体较避免脂质体贮存发化物理变化重建脂质体三种类型：含或含干脂质膜；含或含冻干脂质混合物：含冻干脂质体于干脂质膜或冻干脂质混合物重建所获物包封率限特别亲水性物包封率高悬液含较游离物实际应价值于具适结构亲脂性物重建产品达较满意包封率重建程所需条件例搅拌程度要求高温超声处理等实际应用甚便

于亲水性物选择含冻干脂质体重建形式冰冻程若加入亲水性聚合物葡聚糖能产自由流能利于冻干脂质体水性介质重建例含胰岛素冻干脂质体用种处理其重建包封率达原70％即冰冻重建程胰岛素渗漏率约30％包裹低量物渗漏率能更高些种技术保证脂质体制剂贮存稳定性提供效

四、脂质体测定

脂质体影响脂质体体内处置脂质体重要质量指标测定脂质体激光扫描电显微镜或库尔特粒度析疑电镜测定准确直接观察每脂质体并获各范围内脂质体外形信息要观察量脂质体本非费相反．激光扫描非简单且作快速仅能测脂质体平均性质与类似采用库尔特粒度析仪测脂质体布二种均难描述更精细结构关于粒度测定细节参见本书第十二章

五、脂质体析

()磷脂质析

1．含量测定

直接测定磷脂质浓度比较困难干燥磷脂总含定量残留溶剂或其杂质磷脂广泛使用测定磷脂非直接例含磷量测定于制备脂质体数磷脂言每摩尔磷脂均含1mol磷仅别例外每摩尔磷脂含2mol磷品磷脂浓度通测定磷含量计算介绍二种磷测定

(1)Bartlett

磷脂机磷酸解机磷加入钼酸铵使转化磷钼酸磷钼酸用萘磺酸铵定量原蓝色蓝色强度由光光度测定与标准品(磷酸二氢钾)照即计算含磷量该灵敏度较高且重现性若品含少量机磷则干扰测定

脂质体混悬于缓冲液宜采用Stewart该利用磷脂机溶剂与亚铁硫氰酸铵形色复合物受机磷存影响进行测定计算使用与磷脂结构关转换吸收值换算磷脂毫克数该随磷脂基同异利用磷脂标准液绘制标准曲线计算该适于测定含未知磷脂混合物特别须指该能用于甘油磷脂测定若脂质体含卵磷脂甘油磷脂则用该前者定量再通Bartlett测定总磷脂计算甘油磷脂量

2．磷脂质薄层层析论饱饱磷脂脂质体水性悬液都能水解形溶血磷脂脂肪酸溶血磷脂进步水解形甘油磷脂脂肪酸甘油磷酸间酯键难水解所产游离磷酸甘油精制豆磷脂脂质体水性悬液水解力已研究结表明豆磷脂水解主要受H+OH+催化作用pH6.5左右水解速率体系加入缓冲离醋酸、枸橼酸缓血酸铵轻度增加豆磷脂水解

薄层层析检查磷脂质纯度主要手段与所层析磷脂质薄层层析利用磷脂液态机相亲水性固定相同亲性液相固定相展同磷脂具同保留间根据亲水性强弱改变展剂组改变磷脂两相配系数用固定相硅胶展剂则用①：甲醇：水：(65：25：4 V／V)；②：甲醇：水：氨水(65：35：2.5：2.5 V／V)；③：丙酮：甲醇：醋酸：水(6：8：2：2：1 V／V)；④：环烷(1：1 V／V)等用显色剂碘用50％硫酸 - 甲醇液或液显色

(三)磷脂氧化程度

1．磷脂氧化

磷脂脂肪酸氧化主要由于游离基作用电磁波辐射或者微量游离金属离催化脂肪酸碳链首先脱氢原形游离基进与空气氧发连锁反应含双键碳链更易受影响聚合饱磷脂特别容易氧化降解含单或饱脂肪酸脂质混合物磷脂氧化三阶段进行：①单双键偶合；②氧化物形；③形乙醛及链断裂

2．氧化指数测定

氧化指数用检测游离基偶合指标氧化偶合磷脂230nm左右具紫外吸收峰别于未脂典型紫外吸收图谱图20－12

内提作制备脂质体膜材卵磷脂其氧化指数应控制0.2测定磷脂溶于水乙醇配定浓度澄明溶液别测定波233nm及215nm吸收值按式计算：

氧化指数 = A233nm／A215nm

3．氧化物测定

卵磷脂氧化产丙二醛及溶血磷脂等丙二醛(MDA)酸性条件与硫酸(TBA)反应种红色染料(TBA-Pigment)

该化合物波535nm处特异吸收吸收值即反映磷脂氧化程度丙二醛量与溶血间关系进行研究实验证明每毫升含卵磷脂理盐水丙二醛含量超2.3μg37℃放置1～2h即产溶血

除述估计磷脂氧化程度外根据聚合饱脂肪酸链氧化阶段发断裂或缩短用气 - 液色谱解些酰基链变化

(四)胆固醇析

与磷脂质类似胆固醇纯度及其氧化产物用气 - 液色谱进行检测另外由于胆固醇论游离型酯化型都能与含铁硫酸试剂反应铁复合物波610nm处紫外吸收采用标准胆固醇溶液照计算胆固醇量

六、脂质体灭菌

许研究论文都认脂质体宜用加热灭菌办且各类辐射及各种化灭菌剂敏所能使用滤灭菌或采用菌作进行制备影响脂质体广泛应用于临床重要原

近内采用100℃ 30min湿热灭菌获功灭菌前脂质体形态及均明显变化渗漏率约5％另采用辐射灭菌即用60钴发γ射线三磷酸腺苷脂质体甲氨蝶呤脂质体作辐射灭菌照射剂量15～20kGy菌试验结均由试验前阳性转阴性脂质体粒径灭菌前显著变化灭菌所致渗漏率较

灭菌实用性能与混悬介质种类、磷脂组及纯度等关采用121℃加热20min灭菌处理几种脂质体发现理盐水脂质体发凝聚等渗糖溶液羟基化合物溶液发凝聚加热灭菌具较高氧化物值含蛋卵磷脂散液稍变黄改用具低氧化物值蛋卵磷脂、氢化蛋卵磷脂或DPPC则变化性pH充入氮气阻止颜色变化加入α-育酚效经0.4μm膜滤由蛋卵磷脂组脂质体变变化介质类型明显影响加热灭菌期间包裹羧基荧光素阴离负电荷脂质体(PC／chol／PG)发渗漏使用电荷脂质体(PC／chol／十八胺)仅加热灭菌期间发渗漏且贮存间渗漏

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